IDH1-R132H突变体通过调节HIF-1α通路抑制胶质瘤U87细胞恶性进展
The IDH1-R132H mutant inhibits malignant progression of glioma U87 cells by regulating the HIF-1α pathway
摘要目的 探究异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)-R132H突变体通过调节低氧诱导因子-1α(HIF-1α)通路抑制胶质瘤U87细胞恶性进展.方法 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测胶质瘤组织和细胞IDH1 mRNA和蛋白表达水平.将U87细胞分为对照组、Vector组、IDH1 wt组、IDH1-R132H组,qRT-PCR和Western Blot检测IDH1 wt、IDH1-R132H转染效率,噻唑蓝(MTT)和克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测IDH1、PCNA、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、HIF-1α、HIF-2α蛋白表达.结果 与癌旁组织和正常胶质细胞NHAs相比,胶质瘤组织和人神经胶质母细胞瘤细胞T98G、U138、U87中IDH1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05).qRT-PCR和Western Blot结果表明,IDH1 wt、IDH1-R132H转染成功;与对照组或Vector组比较,IDH1-R132H组细胞活性、PCNA、MMP-2、Bcl-2蛋白表达明显降低,VEGF、HIF-1α、HIF-2α蛋白表达明显升高,且IDH1-R132H组克隆细胞数和迁移细胞数减少,细胞凋亡率、Bax蛋白表达明显增加(P<0.05);但对照组、Vector组、IDH1 wt组上述指标两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 IDH1-R132H突变体可能通过调节HIF-1α通路抑制胶质瘤U87细胞增殖和迁移,并诱导细胞凋亡.
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