敲低Hsa_circ_0020080通过调节脂代谢对人乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的促进作用
Knockdown of Hsa_Circ_0020080 Promotes Proliferation,Migration and Invasion of Human Breast Cancer Cells by Regulating Lipid Metabolism
摘要目的 本研究旨在探讨敲低Hsa_circ_0020080通过调节脂代谢对人乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭行为的影响.方法 定量实时荧光PCR(qRT-PCR)验证Hsa_circ_0020080敲低效率及MDM2、VEGF、FASN、HMGCR、CPT1A、SREBP1基因表达水平.Western blot检测MDM2、VEGF蛋白表达水平.体外采用克隆形成和CCK8实验检测细胞增殖功能;Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭功能.体内构建裸鼠乳房脂肪垫下移植瘤.免疫组化检测MDM2、VEGF、FASN、HMGCR、SREBP1蛋白表达.油红O染色和甘油三酯试剂盒检测甘油三酯表达量.利用脂肪酸合成酶FASN有效抑制剂(C75)进行增殖、迁移和侵袭相关的功能回补实验.结果 体外敲低Hsa circ 0020080能够增加乳腺癌细胞克隆形成、增殖、迁移及侵袭能力,促进MDM2、VEGF、FASN、HMGCR、CPT1A、SREBP1基因及MDM2、VEGF蛋白表达,增加乳腺癌细胞甘油三酯含量;体内敲低Hsa_circ_0020080促进裸鼠移植瘤的生长,增加MDM2、VEGF、FASN、HMGCR、SREBP1蛋白表达及裸鼠移植瘤组织甘油三酯水平.C75能部分逆转敲低Hsa circ 0020080对乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭功能的促进作用.结论 敲低Hsa_circ_0020080可以通过脂代谢促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移功能,提示Hsa_circ_0020080在乳腺癌发展中发挥着重要的生物学作用.
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