摘要目的 探究miR-21-5p靶向调控S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated pro-tein 2,SKP2)/p27通路参与转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞纤维化的作用机制.方法 将人肾小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)随机分为对照组、模型组(TGF-β1诱导)、miR-NC组、miR-21-5p mimic组、miR-21-5p mimic+pcDNA-NC组与miR-21-5p mimic+SKP2过表达组(miR-21-5p mimic+pcDNA-SKP2组).采用CCK-8实验检测各组HK-2细胞的活力;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)1β的水平;实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测各组HK-2 细胞中miR-21-5p、SKP2、p27 mRNA的表达;蛋白质印迹法检测各组HK-2细胞中SKP2/p27信号通路相关蛋白表达和纤维化相关蛋白平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)、胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ)的表达;双荧光素酶报告基因实验探究miR-21-5p与SKP2的靶向关系.结果 与对照组比较,模型组48 h细胞活力[(98.42±3.69)%比(67.49±6.21)%]、72 h细胞活力[(101.35±4.20)%比(62.78±6.48)%]、miR-21-5p水平(1.00±0.10 比 0.34±0.03)、p27 mRNA(1.00±0.11 比 0.43±0.04)与蛋白表达(0.85±0.09 比 0.20±0.02)显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞上清液TNF-α[(57.34±8.22)ng/L比(317.59±26.38)ng/L]、IL-1β水平[(73.49±8.56)ng/L比(372.60±27.55)ng/L]、SKP2 mRNA表达水平(1.00±0.09 比 2.18±0.22)和蛋白表达(0.21±0.02 比 0.84±0.08)、α-SMA(0.26±0.03 比 0.97±0.10)、Fn(0.30±0.03 比 1.04±0.10)、Collagen Ⅰ(0.17±0.02 比 0.87±0.09)蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05).与模型组、miR-NC组相比,miR-21-5p mimic组HK-2细胞相关指标变化与上述相反,差异具有统计学意义(P<0.05).过表达SKP2逆转了过表达miR-21-5p对TGF-β1诱导的HK-2纤维化的抑制作用.miR-21-5p靶向负调控SKP2的表达.结论 miR-21-5p能靶向抑制SKP2/p27通路减轻TGF-β1诱导的HK-2纤维化.