摘要目的 探究弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)组织中具有巨噬细胞表型肿瘤细胞的存在、比例、临床意义和来源,探究能否在体外DLBCL细胞系中诱导CD68+阳性肿瘤细胞.方法 首先通过多重免疫荧光染色定性技术检测DLBCL样本中CD68+CD163+CD20+PAX5-细胞的存在,并检测CD79a+B淋巴细胞、CD68+巨噬细胞以及CD68+CD79a+双阳性细胞的比例.根据双阳性细胞的比例进行分组,探究CD68+B淋巴细胞比例对DLBCL患者预后以及临床病理特征的影响.对具有BCL6基因断裂阳性的病例,使用免疫荧光与免疫原位杂交联合技术进行CD68与BCL6基因断裂共定位,判断具有巨噬细胞表型的B淋巴细胞的肿瘤性质.使用佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)处理DLBCL细胞系(OCI-LY3、SU-DHL2)诱导CD68+肿瘤细胞,通过流式细胞术检测CD68、PAX5蛋白水平变化.采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测B细胞分化发育的重要转录因子PAX5及巨噬细胞相关基因(CD68、ARG1、CD163、CD206、Dectin-1、PU.1、C/EBPα、C/EBPβ)mRNA 水平变化.此外,将 PMA 处理后的 DLBCL 细胞系(OCI-LY3、SU-DHL2)与pH敏感性荧光染料pHrodo共同孵育,以检测PMA处理后DLBCL细胞的吞噬能力.结果 50例DLBCL中CD68+B淋巴细胞比例为0～9.3％,总生存期0.008 2～4.2年,CD68+B淋巴细胞低表达组患者的总生存期显著低于CD68+B淋巴细胞高表达组(P=0.039).CD68+B淋巴细胞比例不同分组间DLBCL的分子分型差异有统计学意义(P=0.009 5).DLBCL中CD68+B淋巴细胞来源于肿瘤细胞.使用PMA处理DLBCL细胞后CD68+细胞和CD68+PAX5-细胞比例显著上升(P＜0.05)、其他巨噬细胞标志物CD68、ARG1、CD163、CD206、Dectin-1、PU.1、C/EBPα、C/EBPβ 以及 PAX5 mRNA 相对表达量与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).PMA处理DLBCL细胞后细胞吞噬能力增强.结论 DLBCL组织中存在一定比例的CD68+B淋巴细胞.CD68+B淋巴细胞比例与患者预后、分子分型相关.体外可以诱导DLBCL细胞系分化为CD68+肿瘤细胞.