摘要目的 探讨诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)技术在骨肉瘤干细胞(osteosarcoma stem cells,OSC)中的应用,构建骨肉瘤诱导多能干细胞(osteosarcoma induced pluripotent stem cell,OS iPSC)并表征其特性,对加速创新和量身定制骨肉瘤干预措施具有重要意义.方法 运用慢病毒颗粒感染成熟骨肉瘤细胞HOS,构建OS iPSC;对OS iPSC进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和免疫荧光染色,鉴定其多能性;悬浮培养OS iPSC制备拟胚体(embryoid body,EB),鉴定其体外分化能力;将OS iPSC定向分化为间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),运用免疫荧光染色技术评估OS iPSC衍生来的MSC(OS iPSC-derived MSC,OS iPSC-MSC);诱导OS iPSC-MSC成骨分化,模拟骨肉瘤的发病过程,运用ALP和茜素红(alizarin red S,ARS)染色观察成骨分化过程.结果 高滴度慢病毒颗粒(7.8×106 IU/μL)感染骨肉瘤细胞后产生OS iPSC,该细胞ALP强阳性,可在mTeSR1培养基中维持未分化状态;免疫荧光染色显示OS iPSC表达多能因子OCT4、NANOG与表面抗原SSEA4;OS iPSC悬浮培养7天后,可形成EB.OS iPSC经过定向诱导培养,43天后可分化为成熟OS iPSC-MSC,免疫荧光染色显示OS iPSC-MSC表面标志物CD44、CD73、CD90和CD105阳性.OS iPSC-MSC成骨诱导分化第9天,ALP和ARS染色呈阳性,并随着分化时间推进,ALP和矿质沉积越来越多,可模拟骨肉瘤发病过程.结论 将HOS重编程并成功构建OS iPSC模型,其可以作为研究骨肉瘤发病机制的体外细胞模型,有望为研究骨肉瘤的发生、发展,开发针对性药物提供理论基础和实验模型.