连续切片结合TSA依赖的多重荧光染色技术在结肠癌TLS检测中的应用
Application of consecutive sections combined with TSA-dependent multiplex fluo-rescence staining technique for the detection of tertiary lymphoid structures(TLS)in colorectal cancer
摘要目的 肿瘤微环境为肿瘤的发生、发展和转移提供了必要的养分和条件,而三级淋巴结构(tertiary lym-phoid structures,TLS)对塑造肿瘤微环境的免疫状态非常重要.本研究为更好地实现TLS组织原位检测和分析,探讨了基于酪胺信号放大系统(tyramide signal amplification,TSA)的多重荧光染色技术在连续切片中实现TLS中多个细胞亚群的检测方案.方法 选取北京大学第三医院病理科存档的6例结肠癌组织制备连续的石蜡切片.利用TSA多重荧光染色技术进行两个组合的细胞亚型标志物染色,通过图像配准及定量分析实现TLS亚群的共检测.结果 两个组合检测到的荧光信号清晰无串扰,配准后可观察TLS中11个细胞亚群的分布和状态.不同样本间TLS的细胞亚群构成呈现异质性.结论 该方法可同时检测TLS中的多种细胞亚群,对评估TLS状态指导临床治疗提供技术支撑.
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