摘要目的 探讨过表达肝细胞生长因子(HGF)慢病毒转染的内皮祖细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用.方法 体外实验方面,提取大鼠骨髓的内皮祖细胞(EPC)并利用DiI-acLDL和FITC-UEA-1双染法进行鉴定.EPC转染慢病毒后采用qRT-PCR实验检测HGF基因表达水平.采用CCK-8实验、Transwell实验以及血管形成实验对转基因EPC的体外功能进行评估.体内实验方面,随机将25只SD大鼠平均分为5组,即对照组(Con组)、正常EPC组(N-EPC组)、空载病毒转染EPC组(LV-NC组)、过表达HGF病毒转染EPC组(LV-HGF组)和假手术组(Sham组).各组大鼠暴露出右侧坐骨神经后,在坐骨神经分叉处上方10 mm处使用止血钳形成2 mm宽的坐骨神经挤压伤,假手术组在暴露神经后不做处理;分别将转染空载慢病毒EPC、转染过表达HGF慢病毒EPC或正常EPC与基质胶按1:1体积比混合后注入伤处神经外膜下,而对照组不注入EPC.术后4周,运用Catwalk检测大鼠运动功能的恢复情况,电生理实验检测神经传导功能的恢复情况,透射电镜观察髓鞘厚度,甲苯胺蓝染色观察神经纤维密度,腓肠肌湿重称重检测肌肉萎缩程度,马松染色检测各组手术侧的腓肠肌肌纤维面积.结果 体外实验结果显示,与正常EPC组相比,LV-HGF组EPC在CCK8实验中细胞增殖速度更快(P＜0.05),Transwell实验中细胞迁移速率更高(P＜0.01),在血管形成实验中形成更多血管状结构(P＜0.01).动物实验结果显示,LV-HGF组的坐骨神经功能指数值显著高于其他3组(Con组,P＜0.01;N-EPC组,P＜0.01;LV-NC组,P＜0.01);复合肌肉动作电位波幅更高(Con组,P＜0.01;N-EPC组,P＜0.05;LV-NC组,P＜0.05);再生坐骨神经的髓鞘较厚(Con组,P＜0.01;N-EPC组,P＜0.01;LV-NC组,P＜0.01);有髓神经纤维密度更高(Con 组,P＜0.01;N-EPC 组,P＜0.05;LV-NC 组,P＜0.05);腓肠肌湿重比值更高(Con 组,P＜0.01;N-EPC 组,P＜0.01;LV-NC 组,P＜0.01);肌纤维平均面积较大(Con 组,P＜0.01;N-EPC 组,P＜0.05;LV-NC组,P＜0.05);LV-HGF组以上实验结果与Sham组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 过表达HGF基因可以增强EPC的增殖、迁移及分化功能.在坐骨神经挤压伤后,HGF基因转染的EPC相较于正常EPC,能更明显地促进了受损周围神经结构和功能的恢复,其机制与促进受损周围神经的轴突再生及髓鞘形成有关.