换一批去甲斑蝥素对食管癌细胞株Eca-109中hTERT的表达和P TP RO基因启动子甲基化影响的实验研究?
Hypermethylation of PTPRO and expression of hTERT in human esophageal cancer cell line Eca-109 trea-ted with norcantharidin
摘要目的：探索去甲斑蝥素（ NCTD）诱导食管癌细胞Eca-109对人端粒酶逆转录酶（ hTERT）表达和受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPRO）基因启动子甲基化的影响。方法 MTT比色法检测不同浓度（0、1、2、4、8、16μg／ml） NCTD及不同作用时间（12、24 h）对食管癌细胞Eca-109增殖的影响；TUNEL法配合激光共聚焦扫描显微镜检测NCTD＋Eca-109组（实验组）和Eca-109组（对照组）细胞凋亡情况；甲基化特异性PCR（MSP）检测实验组和对照组中PTPRO基因启动子的甲基化状态， Western blotting检测实验组和对照组hTERT蛋白的表达。结果 MTT检测显示， NCTD 可抑制Eca-109细胞增殖，呈时间和浓度依赖性，不同作用时间和浓度的细胞增殖抑制率的差异有统计学意义（ P＜0．05）； TUNEL法结合激光共聚焦扫描显微镜观察显示，实验组细胞内部结构发生剧烈的变化，较对照组细胞核染色质致密浓染，核形缩小；MSP检测显示，对照组PT-PRO基因启动子发生明显甲基化；Western blotting 检测显示，实验组 hTERT 蛋白表达较对照组明显降低（ P＜0．05）。结论 NCTD对食管癌细胞Eca-109有细胞毒性，能够抑制细胞生长，其机制可能与下调hTERT蛋白表达和PTPRO基因启动子去甲基化有关。
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关键词
食管癌受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPRO)人端粒酶逆转录酶(hTERT)去甲斑蝥素(NCTD)Esophageal cancerProtein tyrosine phosphatase receptor-type O(PTPRO)Human telomerase reverse transcriptase(hTERT)Norcantharidin(NCTD)
分类号
R735.1（消化系肿瘤）
栏目名称
发布时间
2016-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
湖北省自然科学基金（2010CDZ054）
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