GAL3ST1对肝细胞癌肿瘤进展的影响及机制研究
Effect and mechanism of GAL3ST1 on tumor progression of hepatocellular carcinoma
摘要目的 探究半乳糖-3-O-磺酰基转移酶1(GAL3ST1)对肝细胞癌(HCC)进展的影响及机制.方法 以高转移人肝癌细胞株(MHCC97H)为研究对象,分别转染MHCC97H-GAL3ST1 OE上调GAL3ST1表达(GAL3ST1 OE组)、MHCC97H-GAL3ST1 KD下调GAL3ST1表达(GAL3ST1 KD组),另设不作任何处理的Ctrl组.采用MTT法检测各组细胞的增殖情况;流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡情况;Western blotting检测鞘脂代谢通路蛋白的表达;观察小鼠皮下移植瘤的生长情况;实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组UGT8和GALC mRNA的表达.结果 培养24、48和72 h后,GAL3ST1 OE组细胞存活率分别为(127.27±2.47)%、(152.45±2.41)%和(174.62±0.78)%,均高于Ctrl组的(100±0.0)%、(125.86±1.84)%和(148.17±1.94)%,差异有统计学意义(P<0.05).GAL3ST1 OE组S期细胞比例为(14.95±0.95)%,低于Ctrl组的(30.27±0.24)%,差异有统计学意义(P<0.05).GAL3ST1 OE组早期及晚期细胞凋亡率分别(0.66±0.06)%和(1.51±0.15)%,低于Ctrl组的(2.85±0.21)%和(2.05±0.05)%,差异有统计学意义(P<0.05).与Ctrl组比较,GAL3ST1 OE组Bax降低和Bcl-2、GALC和UGT8蛋白表达增加(P<0.05);GAL3ST1表达上调促进体内肝癌生长,促进Ki-67、PCNA、UGT8和GALC mRNA表达.结论 GAL3ST1可能通过参与鞘脂代谢通路调控HCC进展.
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