Anagliptin通过SOD-1/ROS调控细胞骨架蛋白生成抑制CT-26细胞迁移的实验研究

Anagliptin inhibits CT-26 cell migration by regulating cytoskeletal protein production through SOD-1/ROS pathway

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摘要目的研究二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂Anagliptin对结直肠癌细胞迁移的作用.方法体外培养CT-26细胞;CCK-8实验检测细胞活力;蛋白质印迹实验(Western blotting)检测超氧化物歧化酶-1(SOD-1)和超氧化物歧化酶-2(SOD-2)表达;Transwell小室检测细胞迁移能力;免疫荧光实验检测细胞骨架蛋白(F-actin)和细胞内活性氧原(ROS)形成.结果 CCK-8实验显示,2 mmol/L Anagliptin具有促CT-26 细胞凋亡作用(P<0.01).1 mmol/L Anagliptin孵育CT-26 细胞后,CT-26 细胞迁移能力明显下降(0.375±0.028,P<0.01).共孵育Anagliptin和Tempol(ROS清除剂)后可明显拮抗由Anagliptin所引起的CT-26 细胞迁移抑制(0.527±0.035,P<0.01)及细胞内ROS累积(1.395±0.055 3,P<0.01).CT-26 细胞孵育Ana-gliptin后,细胞内SOD-1表达下降(0.665±0.028,P<0.01),而SOD-2表达无变化(P>0.05).SOD抑制剂DDC孵育CT-26 细胞后,细胞迁移能力明显下降(0.206±0.009,P<0.01).共孵育Anagliptin和Tempol后拮抗由Anagliptin所引起的CT-26 细胞骨架蛋白F-actin合成下降.结论 Anagliptin通过SOD-1/ROS途径调控细胞骨架蛋白(F-actin)生成抑制CT-26 细胞迁移.