换一批纳米二氧化钛颗粒诱导入肺Ⅱ型上皮细胞活性氧的研究
A Study on Induction of the Reactive Oxygen Species(ROS) in A549 Cells by Titanium Dioxide Nanoparticles
摘要[目的]观察纳米二氧化钛(Nano-TiO2)颗粒诱导细胞内活性氧(ROS)的产生情况.[方法]采用直径5nm锐钛型Nano-TiO2颗粒和直径＜10nm、长度加nm金红石型Nano-TiO2颗粒为研究材料,选择细胞质和线粒体部位ROS特异荧光探针二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)及双氢罗丹明123(DHR123),用流式细胞仪测定10、20、40μg/mL不同晶型和粒径的Nano-TiO2颗粒在人肺Ⅱ型上皮(A549)细胞作用不同时间所产生的荧光强度.并在5-160μg/mL浓度下,用中性红方法测定两种Nano-TiO2颗粒的细胞毒性.[结果]锐钛型Nano-TiO2颗粒和金红石型Nano-TiO2颗粒诱导细胞质和线粒体内ROS结果基本相同,作用5min就可检测到ROS,一直持续到2h,而高剂量组诱导ROS大干低剂量组.锐钛型Nano-TiO2颗粒产生ROS峰值在30min,而金红石型Nano-TiO2颗粒产生ROS峰值在60min.用流式细胞仪检测ROS实验中意外出现纳米颗粒峰,峰值高低与纳米颗粒诱导ROS荧光强度反应一致,表明ROS反应与染毒剂量成正比关系,可在同一检测中得到证明.而在实验中未发现两种Nano-TiO2颗粒存在细胞毒性.[结论]Nano-TiO2颗粒可以诱导细胞质和线粒体内ROS产生.
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