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竞争性ELISA法检测人尿金属硫蛋白方法的改进及应用

Improvement and Application of a Competitive ELISA for Detection of Metallothionein in Human Urine

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摘要[目的]改进检测人尿金属硫蛋白(UMT)的竞争性酶联免疫吸附法(ELISA),探讨应用该法测定人尿样标本UMT含量的价值.[方法]分离纯化人肝脏金属硫蛋白(HMT),制备抗金属硫蛋白单克隆抗体(McAb),利用待测样品中MT与包被MT竞争结合McAb的原理,建立竞争性ELISA,并检测健康在校大学生298份尿样中的UMT含量.[结果]竞争性ELISA对人UMT最低检出限为9ng/mL,组内和组间的变异系数分别为1.78%～6.72%和5.45%～13.26%,样品的回收率为99.69%～107.25%.尿样检测结果显示运动后UMT含量为(19.73±8.65)ng/μmol Cr较运动前的(10.58±5.62)ng/μmol Cr明显增加(P<0.05);吸烟群体UMT含量为(86.58±30.96)ng/μmol Cr,显著高于不吸烟人群[(14.73±6.57)ng/μmol Cr](P<0.05).[结论]本法对于检测人UMT具有较好的精密度和准确度,可用于人UMT检测;运动后UMT水平显著升高,吸烟者UMT明显高于正常对照.

作者贾连群 ^[1] 葛正龙 ^[2] 金泰廙 ^[3] 包意芳 ^[4] 欧刚卫 ^[2] 学术成果认领

作者单位辽宁中医药大学基础医学院,辽宁,沈阳,110032;遵义医学院生物化学与分子生物学教研室,贵州,遵义,563003 ^[1] 遵义医学院生物化学与分子生物学教研室,贵州,遵义,563003 ^[2] 复旦大学公共卫生学院劳动卫生教研室,上海,200032 ^[3] 中国疾病预防控制中心寄生虫病研究所,上海,200025 ^[4]

关键词尿金属硫蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附测定

主题词金属硫蛋白(Metallothionein)人(Persons)尿(Urine)性(Sex)方法(Methods)

分类号 R114

栏目名称

论著

发布时间 2010-05-25

基金项目

遵义医学院院基金（F070）