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miR-138-5p在锰致SH-SY5Y细胞自噬中的作用

Role of miR-138-5p in autophagy in SH-SY5Y cells induced by manganese

摘要[目的]探讨miR-138-5p在氯化锰(MnCl2)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬中的作用及其机制.[方法]以生理盐水处理组作为对照,0.125、0.25、0.5、1 mmol/L MnCl2染毒SH-SY5Y细胞6h后,利用MTT法检测细胞活力;0.25和0.5 mmol/LMnCl2处理细胞6h后,采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达;MnCl2染毒6h后,使用反转录PCR和Western blot检测miR-138-5p和组蛋白脱乙酰酶SIRT1 mRNA以及蛋白表达的变化;使用miRNA模拟物转染细胞实现miR-138-5p过表达,然后0.25 mmol/L MnCl2染毒6h,检测SIRT1 mRNA和蛋白的表达以及自噬相关蛋白LC3和Beclin1的变化.[结果] MnCl2可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞活力(趋势x2=12.42,P<0.05).与对照组相比,0.25、0.5 mmol/LMnCl2染毒后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值和Beclin1表达水平明显增加(P<0.05);miR-138-5p表达下调,SIRT1 mRNA及蛋白表达上调(均P<0.05).miR-138-5p过表达后,相比未过表达的MnCl2染毒组,SIRT1 mRNA及蛋白表达均出现下调,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值及Beclin1蛋白表达也相应下调(P<0.05).[结论] miR-138-5p过表达可通过调节SIRT1的表达抑制锰诱导的SH-SY5Y细胞自噬.

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环境与职业医学

环境与职业医学

2018年35卷1期

60-65页

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