摘要[背景]矽肺的发病机制复杂,且治疗方法有限.二氧化硅(SiO2)诱导的转化生长因子-β1(TGF-β1)的增加能够激活成纤维细胞以促进胶原蛋白沉积,最终导致纤维化.已有研究证实脂质代谢在矽肺的进展中发挥着重要作用.过氧化物酶体增殖物激活受体 γ共激活因子1α(PGC1α)在糖尿病模型中可介导线粒体功能障碍和脂质代谢等通路,但在矽肺中的作用尚未阐明.[目的]探讨PGC1α在SiO2 诱导的巨噬细胞脂质代谢紊乱中的作用及对矽肺纤维化进展的影响.[方法](1)通过在巨噬细胞中转染沉默PGC1α及其对照序列,并给予SiO2 刺激,将巨噬细胞分为四组:阴性对照组(转染si-NC培养 48 h)、敲低PGC1α组(转染si-PGC1α培养 48 h)、SiO2 刺激组(转染si-NC培养 48 h后,50 μg·mL-1 SiO2 刺激 36 h)和敲低PGC1α+SiO2 组(转染si-PGC1α培养 48 h后,50 μg·mL-1 SiO2 刺激 36 h).Western blot和细胞免疫荧光检测PGC1α的表达,4,4-二氟-1,3,5,7,8-五甲基-4-硼杂-3a,4a-二氮杂-s-引达省(BODIPY 493/503)和总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)试剂盒检测脂质蓄积情况,Oroboros2k-Oxygraph呼吸检测系统(O2K)评估PGC1α对线粒体呼吸链的影响.ELISA试剂盒检测巨噬细胞上清液中TGF-β1的表达.(2)将肺成纤维细胞分为上述相同的四组,将上述各组巨噬细胞的上清液刺激肺成纤维细胞,细胞免疫荧光和Western blot检测Ι型胶原(COL Ι)、E-钙粘蛋白(Eca)和纤连蛋白(FN)的表达以进一步评估沉默PGC1α对纤维化的影响.[结果]SiO2 刺激导致PGC1α蛋白表达水平降低,蛋白的相对表达水平是对照组的 0.78倍(P<0.05).转染si-PGC1α序列后,PGC1α表达降低,敲低PGC1α组的蛋白相对表达水平是对照组的0.86倍(P<0.05).与SiO2 刺激组相比,敲低PGC1α+SiO2 组中BODIPY 493/503着色面积增强,胆固醇相关指标TC、FC和胆固醇酯(CE)增多,敲低PGC1α+SiO2 组中TC、FC和CE的水平是SiO2 刺激组的 1.38倍、1.10倍和 2.26倍(P<0.05);线粒体复合体Ι活性降低,敲低PGC1α+SiO2 组中复合体Ι的水平是SiO2 刺激组的 0.63倍(P<0.05);巨噬细胞分泌的TGF-β1增多,敲低PGC1α+SiO2 组中TGF-β1的水平是SiO2 刺激组的1.15倍(P<0.05).此外,将各组巨噬细胞的上清液刺激原代肺成纤维细胞后,沉默PGC1α导致COL Ι、FN表达水平增加,Eca表达降低,敲低 PGC1α+SiO2 组中 COL Ι、FN和 Eca的蛋白水平分别是 SiO2 刺激组的1.39倍、1.18倍和0.82倍(P<0.05).[结论]沉默PGC1α加剧了SiO2 诱导的脂质代谢紊乱,抑制了线粒体呼吸链,并加剧了SiO2诱导的纤维化.提示PGC1α可能通过调控线粒体呼吸链调节SiO2 诱导的脂质代谢紊乱参与矽肺纤维化的进展.