摘要[背景]天然除虫菊素被广泛应用于环境和家庭卫生领域.研究显示,其具有潜在的肝脏毒性,但具体机制尚不明确.[目的]探讨天然除虫菊素对人肝细胞DNA损伤的影响.[方法]本研究以人肝细胞QSG7701为体外测试模型,以未处理细胞为对照组,以经系列质量浓度(后称浓度)(5、10、20和 40 μg·mL-1)天然除虫菊素暴露 6 h或 24 h后作为处理组.分别采用荧光探针法经荧光显微镜检测细胞活性氧(ROS)的荧光强度;采用比色法经酶标仪检测细胞内硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)的水平;采用彗星电泳试验镜下观察DNA断片迁移以检测DNA损伤程度;采用免疫荧光试验通过激光共聚焦对细胞磷酸化H2AX(γH2AX)及8-氧鸟嘌呤(8-oxoG)水平等指标进行检测.[结果]随着天然除虫菊素浓度的升高,ROS荧光强度呈剂量依赖性升高,与对照组相比,10 μg·mL-1 及以上浓度组差异均有统计学意义(P<0.01),其中 20 μg·mL-1 和 40 μg·mL-1 处理组ROS水平是对照组的 2.17和 3.05倍;TBARS水平随着天然除虫菊素浓度升高而升高(P<0.01),20 μg·mL-1 和 40 μg·mL-1 天然除虫菊素处理组的TBARS水平是对照组 2.46和3.01倍;彗星试验结果显示,各浓度组细胞DNA呈现不同程度的拖尾,随着天然除虫菊素暴露浓度的增高,尾部DNA含量(TDNA%)、尾长(TL)、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)等指标呈剂量依赖性增高,与对照组相比,20 μg·mL-1 及以上浓度组差异均有统计学意义(P<0.01),其中40 μg·mL-1 浓度组TDNA%、TL、TM及OTM指标分别为(46.92±3.52)%、(64.67±4.16)μm、30.96±2.94和 22.64±3.89.细胞免疫荧光结果显示天然除虫菊素可诱导γH2AX和 8-oxoG的形成,且荧光强度呈剂量依赖性增高,与对照组相比,在10 μg·mL-1 及以上浓度组相对荧光强度的增高均有统计学意义(P<0.01).[结论]天然除虫菊素可诱导人肝细胞DNA损伤,且ROS介导的氧化应激可能在其诱导的肝细胞遗传毒性中发挥了重要作用.