换一批
换一批载脂蛋白E背景E1A激活基因阻遏子转基因小鼠建立及鉴定
Establishment and identification of apolipoprotein E backgrouond cellular repressor of E1A-stimulated genes transgenic mice
摘要目的 建立并鉴定载脂蛋白E(ApoE)背景E1A激活基因阻遏子(CREG)转基因(ApoE-/-CREGTg)小鼠.方法 将雄性ApoE--小鼠与雌性CREGTg小鼠进行交配,获得雄性ApoE+/-小鼠和雌性ApoE+/-CREGTg小鼠,再将两者进行交配,以获得ApoE--CREGTg小鼠.第4 周时,提取鼠耳基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳进行基因型鉴定.提取小鼠脂肪组织和脾组织的RNA、蛋白,采用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法检测小鼠脂肪组织和脾组织CREG基因转录水平、蛋白表达水平.结果 子代小鼠中,ApoE+/+小鼠9 只(12.33％),ApoE+/+CREGTg小鼠10 只(13.70％),ApoE+/-小鼠19 只(26.03％),ApoE+/-CREGTg小鼠16 只(21.92％),ApoE-/-小鼠 8 只(10.95％),ApoE-/-CREGTg小鼠 11 只(15.07％),成功构建ApoE--CREGTg小鼠模型.ApoE-/-CREGTg小鼠脂肪组织、脾组织的CREG基因转录水平、蛋白表达高于ApoE--小鼠,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 本研究成功建立了ApoE-/-CREGTg小鼠模型,为深入阐明CREG在动脉粥样硬化等心血管疾病中的作用及机制提供了新的实验工具.
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