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长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5在糖尿病肾病进展中作用机制研究

Study on the mechanism of long non-coding RNAs growth arrest-specific transcript 5 in the progression of diabetic nephropathy

摘要目的 探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本 5(LncRNA GAS5)在糖尿病肾病(DN)进展中的作用机制.方法 选取 10 只健康 5 周龄大鼠为研究对象.将大鼠分为模型组与对照组,每组各 5 只.构建 DN 细胞模型,并分为LncRNA GAS5 干扰组、LncRNA GAS5 过表达组与阴性对照组.通过实时荧光定量聚合酶链式反应及蛋白质印迹法检测LncRNA GAS5、miR-135a-5p及沉默信息调节因子2 相关酶1(SIRT1)的表达水平.采用双荧光素酶报告实验验证miR-135a-5p与LncRNA GAS5、SIRT1 之间的相互作用.结果 模型组肾组织、血清外泌体、人肾小球系膜细胞(HMC)及上清外泌体中LncRNA GAS5 表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).敲减或过表达LncRNA GAS5 后,LncRNA GAS5 过表达组HMC细胞中miR-135a-5p表达水平相应高于或低于阴性对照组,而SIRT1 表达水平相应低于或高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).感染miR-135a-5p或转染siSIRT1 后,LncRNA GAS5 过表达组对HMC细胞增殖的抑制作用及对α-平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白、α(I)胶原表达的抑制作用均弱于阴性对照组,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 LncRNA GAS5 可通过miR-135a-5p/SIRT1 通路调控DN的进展.

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