换一批
换一批赤松ISSR-PCR反应体系的建立与优化
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Pinus densiflora
摘要为了建立赤松ISSR-PCR反应体系,利用正交试验分别对影响赤松PCR反应的dNTP浓度、Mg2+浓度、Taq酶浓度、引物浓度、模板浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定引物的最佳退火温度和循环次数.最终确定赤松ISSR-PCR最佳反应体系及扩增条件为:25 μL反应体系中含2.5 μL 10 ×PCR Buffer、3mmol·L-1dNTP、1.5 mmol·L-Mg2+、0.5 UTaq酶、0.3μmol·L-引物、9 ng模板;扩增程序为:94℃预变性5min,然后进行94℃变性30 s,55℃退火45 s(退火温度随引物不同而变化),72℃延伸2min,35个循环,最后72℃延伸7 min.这一ISSR-PCR反应体系,为今后利用ISSR技术对赤松进行物种分类鉴定奠定了基础.
更多相关知识
- 浏览1
- 被引3
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
