白桦BpSAUR24-like基因启动子克隆及表达特性分析
Cloning and Expression Analysis of BpSAUR24-like Gene in Betula platyphylla
摘要Small auxin-up RNA(SAUR)基因作为生长素的早期响应基因之一,其在植物顶钩发育、细胞扩增及生长素转运等多方面发挥作用.研究白桦中BpSAUR24-like基因启动子中顺式作用元件、组织表达特性及对不同激素的应答反应,可为进一步探究BpSAUR24-like基因功能奠定基础,也可为白桦分子设计育种提供理论依据.试验以白桦全基因组DNA为参考,预测BpSAUR24-like基因的上游 1501 bp为启动子序列,利用PLACE在线软件对BpSAUR24-like基因启动子序列含有的顺式作用元件进行预测,构建BpSAUR24-like基因启动子融合GUS基因的植物表达载体进行拟南芥遗传转化,对转基因拟南芥进行GUS染色.以野生型白桦生根苗的顶芽、第一叶片、第二叶片、第三叶片、幼茎、成熟茎和根为材料,进行实时定量PCR,探究BpSAUR24-like基因组织表达特性.分别用IAA、ABA和GA3 处理野生型白桦,探究BpSAUR24-like基因对不同激素的应答反应.结果表明,通过PCR成功克隆了BpSAUR24-like基因上游 1501 bp启动子序列,顺式作用元件分析显示,Bp-SAUR24-like基因启动子区域含有众多不同类型的顺式作用元件,除包含TATA-box、CAAT-box和GATA-box等启动子核心序列外,还包含多种光响应、激素响应以及胁迫应答元件.转基因拟南芥GUS染色及对野生型白桦不同组织部位表达特性分析表明,BpSAUR24-like基因在拟南芥和白桦不同组织部位均有表达,但在白桦叶和茎的幼嫩组织中表达量较高,在第三叶和根中表达量较低.BpSAUR24-like基因对不同激素的早期响应也不同,在IAA和ABA处理下上调表达,在GA3 处理下下调表达,其中BpSAUR24-like基因能够在IAA和GA3处理的早期做出响应.BpSAUR24-like基因可能通过多种激素调控路径参与白桦叶和茎幼嫩组织发育过程调控.
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