1,25(OH)2D3对小鼠皮肤创伤愈合的作用及机制研究
Study on the effects of 1,25(OH)2D3 on cutaneous wound healing and the underlying mechanisms in mice
摘要目的 探讨1,25(OH)2D3参与皮肤全层切割伤小鼠创面愈合的作用及机制.方法 将40只5周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为5组,包括皮肤创伤组、皮肤创伤+维生素D受体(VDR)抑制剂组、皮肤创伤+维生素D受体(VDR)激动剂组、皮肤创伤+维生素D药粉(VD)组、正常对照组,每组8只.观察创面愈合情况,拍照并记录创面大小,计算创面愈合率.在创面处理第9天时,ELISA检测各组小鼠血清中1,25(OH)2D3的浓度;取创缘组织,HE染色检测创面组织病理变化,免疫荧光染色检测组织中VDR、CD31的表达情况,分别用qRT-PCR、Western Blot检测小鼠组织中VDR、Notch1、TNF-α、IL-17A、IL-17F和IL-22的mRNA和蛋白的表达.结果 在小鼠伤口愈合第9天时,与正常对照组比较,皮肤创伤组血清1,25(OH)2D3浓度、创面组织VDR、CD31表达降低(P<0.05),TNF-α、IL-17A、IL-17F和IL-22表达升高,Notch1表达差异无统计学意义(P>0.05);与皮肤创伤组比较,皮肤创伤+VDR激动剂组、皮肤创伤+VD组小鼠皮肤创面愈合率、血清1,25(OH)2D3浓度、创面组织VDR、CD31、Notch1 表达升高(P<0.05),创面组织 TNF-α、IL-17A、IL-17F、和 IL-22 表达降低(P<0.05),皮肤创伤+VDR抑制剂组小鼠皮肤创面组织TNF-α、IL-22的蛋白表达升高(均P<0.01),创面愈合率、血清1,25(OH)2D3 浓度、创面组织 VDR、CD31、Notch1、TNF-α、IL-17A、IL-17F、IL-22 的 mRNA 和 Notch1、IL-17A、IL-17F的蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05).HE染色结果显示,皮肤创伤+VDR激动剂组、皮肤创伤+VD组小鼠的伤口组织炎性细胞浸润减轻且血管生成增加、真皮结缔组织较致密,表皮基本完成再上皮化.结论 1,25(OH)2D3能够促进皮肤全层切割伤小鼠创面愈合,可能是通过减轻创面炎症因子TNF-α、IL-17A、IL-17F和IL-22的表达,促进Notch1受体和VDR的表达和血管生成实现的.
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