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1株猪源肠球菌的分离鉴定及其致病性特征分析

Isolation and identification of a porcine-derived Enterococcus strain and analysis of its pathogenicity characteristics

摘要研究旨在明确辽宁省沈阳市某养猪场腹泻仔猪感染的病原菌,进一步分析其耐药性与致病性等特征.采用无菌操作采集该猪场腹泻仔猪的粪便样本,经分离纯化、革兰染色、MALDI-TOF MS及16S rRNA基因测序等方法进行病原菌鉴定,并结合药敏试验及耐药基因、可移动遗传元件比对探究分离株的耐药性,通过毒力基因比对、大蜡螟致死性试验和小鼠致病性试验探究其致病性.结果显示,分离株在BHIA培养基上形成乳白色、不透明的圆形小菌落;镜检可见该菌为蓝紫色、椭圆形或圆形,呈单独、成对或短链状排列的革兰阳性菌;MALDI-TOF MS鉴定为粪肠球菌(Enterococcus faecalis);经16S rRNA基因序列比对,分离株与已发表的粪肠球菌序列相似度高于99%,鉴定为粪肠球菌并命名为HS1.分离株对氨苄西林、环丙沙星等4种抗生素敏感,对红霉素、四环素等5种抗生素耐药,并携带aac(6')、erm(A)、tet(M)等多种耐药基因和cyl、gelE、efaA等多种毒力基因.分离株可使所有大蜡螟幼虫在12 h内完全黑化并死亡,具有较强的致病潜力;小鼠在攻菌后出现腹泻现象,剖检后发现盲肠和结肠有明显病变,表明分离株具有较强的致病力.研究表明,该猪场仔猪腹泻由1株多重耐药且高致病性的粪肠球菌引起,结果为由肠球菌导致的仔猪腹泻疾病的防控、临床合理用药及相关流行病学研究提供参考.

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