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重组人β淀粉样蛋白1-42小规模发酵及小量纯化工艺的摸索

Small scale fermentation and a small purification technology of recombinant human β-amyloid peptide 1-42

摘要目的 研究重组人β淀粉样蛋白1-42(rhAβ1-42)在5L摇瓶中的高密度发酵实验,以及小量纯化工艺的方法.方法 分别从甲醇浓度、pH、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生rhAβ1-42的发酵过程进行了优化;通过硫酸铵沉淀目的蛋白、透析、脱盐和阴离子交换层析,对rhAβ1-42小量精确的纯化方法进行了研究.结果 确定rhAβ1-42在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为:在pH6.0的条件下,以0.5%甲醇诱导72 h,经过硫酸铵沉淀目的蛋白、透析、脱盐和阴离子交换层析,rhAβ1-42纯度可达94%以上.结论 确定了rhAβ1-42在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,建立了小量纯化rhAβ1-42的新方法.

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