摘要目的 利用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)激活的非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型探讨并验证五味子乙素(Sch B)通过调控mTOR/转录因子EB(TFEB)通路抑制脂质堆积的作用机制.方法 利用高效液相色谱法(HPLC)测定Sch B纯度;建立游离脂肪酸(FFA)刺激的HepG2细胞模型,并将细胞分为模型组、Sch B(50 μmol/L)组、MHY1485(5 μmol/L)组和MHY1485+Sch B组.采用微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)自噬双标腺病毒感染检测自噬流变化;采用油红O染色法检测细胞脂质水平;采用Western-blot法检测蛋白表达水平;采用免疫荧光检测TFEB的核转位;采用比色法检测细胞脂肪酸β氧化产物β-羟基丁酸(β-HB)含量.结果 与模型组相比,Sch B可提高NAFLD细胞自噬流,并能调控自噬关键蛋白mTOR、p70、UNC-51样自噬激活激酶1(ULK1)磷酸化水平以及Beclin-1、LC3B-Ⅱ和p62表达水平,而mTOR激动剂MHY1485干预显著抑制Sch B调控上述自噬相关蛋白表达的作用.Sch B降低TFEB Ser122磷酸化表达,并促进TFEB入核,上述作用均被MHY1485干预逆转.同时,Sch B减少FFA刺激下HepG2细胞脂质堆积,增加β-HB含量,提高脂肪酸β氧化关键酶过氧化物酶体酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)、长链脂酰辅酶A脱氢酶(ACADL)、中链脂酰辅酶A脱氢酶(ACADM)和3-羟甲基戊二酰辅酶A合酶2(HMGCS2)蛋白表达水平,MHY1485显著减弱Sch B上述作用.结论 Sch B能通过调控mTOR/TFEB通路诱导NAFLD细胞自噬并促进脂肪酸β氧化,从而抑制肝细胞脂质堆积.