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基于黄芩-黄连不同配伍比例促进狄氏副拟杆菌增殖作用的谱效关系研究

Spectrum-Effect Relationship of Huangqin(Scutellariae Radix)-Huanglian(Coptidis Rhizoma)in Different Proportions Promoting Proliferation of Parabacteroides distasonis

摘要目的 通过考察黄芩-黄连不同配伍比例促进益生菌-狄氏副拟杆菌(Parabacteroides distasonis,Pd)增殖的作用,结合谱效关系研究筛选并验证黄芩-黄连配伍药对中促进Pd增殖的有效成分.方法 首先采用体外培养的研究方法,考察黄芩-黄连不同配伍比例(3∶0、3∶1、3∶2、3∶3、2∶3、1∶3、0∶3)和不同配伍浓度(0.03125~0.5 g生药/mL)对Pd增殖作用的影响,然后在最佳配伍浓度下建立黄芩-黄连不同配伍比例的超高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)的指纹图谱,采用正交偏最小二乘回归分析进行谱-效相关性研究,筛选促进Pd增殖的有效成分,并验证此类成分促进Pd增殖的作用.结果 黄芩-黄连配伍比例为3∶1,浓度为0.0625 g生药/mL时促进Pd增殖的作用最强,与同浓度的黄芩、黄连单味药组相比,配伍后明显提高了 Pd的增殖作用.建立的指纹图谱共检测出23个色谱共有峰,通过对照品比对、数据库和参考文献鉴定出21个成分,其中黄芩药材来源的11号峰黄芩苷、12号峰芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、13号峰白杨素-7-O-β葡萄糖醛酸苷、14号峰黄芩苷甲酯、15号峰汉黄芩苷、16号峰黄芩黄酮Ⅱ、17号峰黄豆黄素以及黄连药材来源的9号峰小檗碱与Pd的增殖存在显著相关关系.在谱效关系验证实验中,通过检测黄芩-黄连最佳配伍药对(3∶1)中黄芩苷和小檗碱的含量,制备该浓度的黄芩苷-小檗碱配伍溶液进行验证,发现验证结果与预测结果相一致,而且该成分配伍与同浓度下黄芩苷和小檗碱的单用相比,亦可明显提高对Pd的增殖作用.结论 该研究建立的谱效关系筛选出了黄芩-黄连配伍促进Pd增殖的有效成分,结合谱效验证实验明确了黄芩-黄连配伍药对中的黄芩苷-小檗碱是促进Pd增殖的有效成分之一,为阐明黄芩-黄连配伍促进Pd增殖作用的物质基础提供了实验依据,也为其进一步的开发应用提供重要的参考价值.

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