黄芪甲苷促过氧化氢诱导损伤的人内皮祖细胞向内皮细胞分化和成管的实验研究
Experimental Study on Astragaloside Ⅳ Promoting Differentiation and Tube Formation of Human Endothelial Progenitor Cells Injured by Hydrogen Peroxide
摘要目的 探讨黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的人内皮祖细胞(endothelial pro-genitor cells,EPCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化和成管能力的影响.方法 取外周血分离并培养待鉴定的细胞,通过观察细胞形态、4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)核染及FITC-UEA-Ⅰ和Dil-AC-LDL双荧光联合染色法对培养的人EPCs进行鉴定.将鉴定成功的人EPCs用500 μM H2O2模拟氧化应激环境预处理3 h后,随机分为实验组、模型组并设置正常组,实验组加入100 mg/L AS-Ⅳ培养48 h;模型组和正常组用等体积的PBS液处理培养48 h.采用免疫荧光技术检测CD31、vWF表达水平以检测人EPCs向ECs分化的能力,采用Matrigel体外成管实验检测细胞成管能力.结果 成功得到人EPCs.免疫荧光检测显示,与正常组相比,模型组CD31、vWF荧光强度显著降低(P<0.01);与模型组相比,实验组CD31、vWF荧光强度显著升高(P<0.01).Matrigel体外成管实验显示,与正常组相比,模型组受损人EPCs向ECs分化后形成血管交叉点、血管总长度、血管分支长度较正常组明显降低(P<0.05);与模型组相比,实验组中受损人EPCs向ECs分化后血管总长度、血管分支长度明显增多(P<0.05),血管交叉点差异无统计学意义.结论 AS-Ⅳ可促进氧化应激损伤的人EPCs向ECs分化和成管,具有促进血管新生的潜能.
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