芪冬宁方靶向Beclin-1维持细胞紧密连接抗肺癌转移的机制研究
Mechanism of Qidongning Formula(芪冬宁方)Targeting Beclin-1 and Maintaining Tight Junction in A549 Cells Against Lung Cancer Metastasis
摘要目的 探讨芪冬宁方通过自噬抗肺癌转移的可能机制.方法 不同浓度的芪冬宁方干预A549 细胞,Transwell实验检测细胞迁移率及侵袭率,Western Blot法检测紧密连接相关蛋白ZO-1、Claudin-1;使用自噬抑制剂氯奎(chloro-quine,CQ),观察芪冬宁方对A549 细胞迁移、侵袭效应及紧密连接相关蛋白ZO-1、Claudin-1 表达的影响.应用RNA干扰技术敲减自噬上游关键基因Beclin-1,观察敲减Beclin-1 后,芪冬宁方对A549 细胞迁移、侵袭效应的影响,检测紧密连接相关蛋白ZO-1、Claudin-1 的变化.结果 芪冬宁方可以抑制A549 细胞增殖、迁移、侵袭,呈剂量依赖性,可以上调ZO-1、Claudin-1 的表达;自噬抑制状态下,芪冬宁方抑制A549 迁移、侵袭,上调ZO-1、Claudin-1 表达的能力减弱;敲低Beclin-1 后,芪冬宁方抑制A549 迁移、侵袭,上调ZO-1、Claudin-1 表达的能力减弱.结论 芪冬宁方发挥抗肺癌转移的作用可能是通过Beclin-1 介导自噬调控细胞紧密连接实现的.
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