电针对干眼兔模型TLR4/NF-κB通路和Th1/Th2细胞因子表达的影响
Effects of Electroacupuncture on TLR4/NF-κB Pathway and Th1/Th2 Cytokine Expression in Dry Eye Rabbit Model
摘要目的 探讨电针对干眼兔泪腺Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路和Th1/Th2细胞因子的表达的影响,分析电针对干眼的作用机制.方法 取雌雄不拘的健康新西兰兔24只随机分为空白组、模型组、电针组、西药组,每组6只,空白组不作处理;其余3组以氢溴酸东莨菪碱2.0 mg/kg,皮下注射4次/d,连续35 d.电针组和西药组在第22天进行治疗,每天1次,共14 d.不同时间段进行角膜荧光染色、泪膜破裂时间、泪液流量测定和光镜检测,ELISA法检测白细胞介素-4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)含量,免疫组化法检测结膜、泪腺、角膜NF-κB蛋白表达,蛋白质印迹学检测泪腺、TLR4、NF-κB、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达,PCR检测TLR4和iNOS的mRNA表达.结果 实验第27、35天同时段电针组与模型组相比角膜荧光染色和评分减少,泪膜破裂时间延长,泪液流量增多,差异均有统计学意义(均P<0.05);光镜示电针组与模型组相比,结膜、泪腺角膜组织损伤改善;ELISA结果示与模型组相比,电针组泪腺中IFN-γ含量降低,IL-4含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果示与模型组比较,针刺组结膜、泪腺组织中NK-κB p65蛋白表达降低(P<0.05);蛋白质印迹学结果显示与模型组相比,电针组下调TLR4、p-NF-κBp65、iNOS的表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05).PCR结果显示与模型组相比,电针组下调TLR4的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05).结论 针灸可以改善兔干眼模型泪腺炎症和损伤,并且可以通过抑制TLR4/NF-κB通路和Th1/Th2细胞因子的表达的途径发挥作用.
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