补肾活血导法调控围着床期LXA4R/NF-κB及上皮-间质转化时序表达改善大鼠胚胎植入的机制研究
Study on Mechanism of Bushen Huoxue Recipe(补肾活血方)Enema in Improving Embryo Implantation by Regulating LXA4R/NF-κB and Epithelial-Mesenchymal Transition Sequential Expressions in Rats During Peri-Implantation Period
摘要目的 研究补肾活血导法调控大鼠围着床期脂氧素A4受体(lipoxin A4 receptor,LXA4R)/核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)时序表达的助孕机制,绘制时序表达谱.方法 采用羟基脲、肾上腺素联合LXA4复制肾虚血瘀-着床障碍大鼠模型,随机分为空白组、模型组、中药(优效剂量)组,均在交配后第4天(4 dpc)、6、8 dpc分别取材.观察大鼠一般情况及胚胎着床情况,检测凝血四项,HE染色观察子宫内膜形态,扫描电镜观察内膜胞饮突发育;ELISA检测血清雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)水平,Western blot 及 RT-qPCR 检测子宫 LXA4R、(p-)NF-κB p65、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadher-in)的蛋白及mRNA表达.结果 补肾活血导法能改善模型大鼠一般情况,显著增加8 dpc模型大鼠子宫指数及胚胎着床数(P<0.05),明显提高4/6 dpc模型大鼠血浆凝血酶时间(thrombin time,TT)(P<0.05),降低血浆纤维蛋白原(fibrino-gen,FIB)含量(P<0.05),显著改善模型大鼠围着床期子宫内膜形态及胞饮突发育.补肾活血导法还能明显下调6 dpc模型大鼠子宫LXA4R蛋白及mRNA、E-cadherin蛋白表达(P<0.05),上调NF-κB p65磷酸化蛋白及mRNA、N-cad-herin蛋白及mRNA水平(P<0.05).结论 补肾活血导法能改善模型大鼠病证情况,促进大鼠子宫内膜与胚胎同步发育,显著调控围着床期模型大鼠子宫LXA4R/NF-κB及EMT时序表达,一定程度修复母胎界面"抗炎-促炎-抗炎"微环境稳态及EMT进程,改善胚胎植入.
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