改良考马斯亮蓝试剂法测定壳聚糖及其衍生物中蛋白质含量
Determination of Protein Content in Chitosan and Its Derivatives by Modified Coomassie Brilliant Blue Reagent Method
摘要经典的考马斯亮蓝试剂测定壳聚糖及其衍生物中的可溶性蛋白含量时,能与氨基多糖样品本身形成絮状沉淀,干扰了蛋白质测定结果的准确度.本文探讨经改良的考马斯亮蓝试剂测定壳聚糖及其衍生物中可溶性蛋白质含量的精确性.选用一定量的盐酸替代磷酸配制考马斯亮蓝试剂,对壳聚糖及其衍生物中蛋白质含量进行测定.结果表明,新配方的考马斯亮蓝试剂与蛋白结合后,染料的最大吸收峰位置发生变化,吸光度与蛋白含量间具有良好的线性关系(R2=0.9941),回收率为118.74%,最小检出量为1μg·mL-1.采用改良后的考马斯亮蓝试剂法测定壳聚糖及其衍生物中的微量蛋白质含量准确可靠.
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