人表皮生长因子受体-2siRNA联合卡铂对肺腺癌A549细胞株的抑制作用

THE INHIBITION OF A549 CELLS BY SIRNA TARGETING C-ERBB-2 GENE COMBINED WITH CARBOPLATIN

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摘要目的:应用人表皮生长因子受体-2(C-erbB-2)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)联合卡铂作用于肺腺癌A549细胞株,探讨siRNA敲除C-erbB-2基因联合卡铂对A549细胞的抑制作用,为开拓肺腺癌患者治疗的新途径提供实验依据.方法:应用CCK-8比色法检测不同浓度的卡铂在不同时间点对A549细胞的抑制率.设计并合成3对C-erbB-2siRNA(2621组、1724组、1491组),分别转染肺腺癌A549细胞,应用实时荧光定量RT-PCR检测该基因的mRNA水平,筛选出最佳siRNA.再应用CCK-8比色法检测卡铂与C-erbB-2 siRNA联合应用时A549细胞的抑制率.结果:卡铂对A549细胞的生长有显著抑制作用.随着浓度的升高(r=0.415,P＜0.001)、作用时间的延长(r=0.689,P＜0.001),细胞的抑制率升高.48h的IC50为25.99mg/L.3对siRNA中2621组和1724组干扰效果最佳(F=11.854,P＜0.05).CCK-8比色法检测显示,A549细胞的抑制率分别为:siRNA干扰组(28.68±1.98)％、卡铂组(45.63 +2.14)％、siRNA+卡铂组(59.62±1.35)％,其中siRNA+卡铂组抑制率最高,与其它各组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:C-erbB-2 siRNA与卡铂具有协同作用,能抑制A549细胞增殖.