茎-环反转录实时PCR技术分析miR-93和miR-342在乳腺癌细胞系中的表达*

Expression analysis of miR-93 and miR-342 in breast cancer cell lines by stem-loop reverse transcription real-time PCR technique

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摘要目的：应用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测分析小的非编码分子miR-342和miR-93在乳腺癌细胞中的表达。方法：用miR特异性试剂盒（miRNeasy Mini Kit）提取了总RNA和miRNA，进行特异性茎-环反转录和实时PCR( stem-loop reverse transcription real-time PCR, stem-loop RT-qPCR)，检测miR-342和miR-93在5种乳腺癌细胞中的表达，并进行比较分析。结果：用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测发现miR-93在T47D细胞系中呈非常高的表达，BT-549和MCF7细胞系中呈相对高表达，在MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞系低表达；而miR-342在MCF7中呈非常高的表达，MDA-MB-231，BT-549和T47D中呈相对低表达，在MDA-MB-435中表达特别低。结论：miR-93和miR-342的表达在某种程度上与乳腺癌细胞高侵袭性呈一定负相关，表明miR-93和miR-342可能是乳腺癌的抑癌基因并可能具有抑制其转移的作用，为深入分析miR-93和miR-342抑制乳腺癌转移的作用机制奠定了基础。