换一批家蚕变应原tropomyosin基因的克隆表达、纯化及其免疫学活性鉴定
Cloning, expression, and purification of silkworm(Bombyx mori)tropomyosin gene and identifying its immunological characteristics
摘要目的 对家蚕过敏原tropomyosin基因进行克隆表达,鉴定其免疫学活性.方法 本研究提取家蚕总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出tropomyosin片段,其长度为858 bp,编码286个氨基酸.通过连入载体PET28a在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)菌株中通过IPTG诱导得到重组家蚕原肌球蛋白.重组家蚕原肌球蛋白经过6His-tag蛋白纯化系统分离、纯化.经Western blot检测该重组蛋白与家蚕过敏患者血清中IgE的反应性.结果 19个病人血清反应中,有5个呈阳性,阳性率为26%.结论 成功克隆表达了家蚕tropomyosin基因,经免疫学鉴定发现其具有过敏原性.
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2010-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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