换一批淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒GP2单克隆抗体的制备和鉴定
Preparation and identification of monoclonal antibody against GP2 of lymphocytic choriomeningitis virus
摘要目的 制备淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)单克隆抗体(mAb).方法 采用杂交技术获得并筛选出杂交瘤细胞,收集含单克隆抗体的培养上清行免疫荧光(IFA)、dot-blot、ELISA法鉴定抗体重链类型和测定单克隆抗体的免疫效价.用蛋白G Sepharose亲和层析填料纯化抗体,纯化后的抗体采用SDS-PAGE检测纯化效果,并进一步用Western blot检查抗体对LCMV的作用部位.结果 成功获得能稳定分泌抗LCMV的特异性杂交瘤细胞株,顺利获得纯化的单克隆抗体,命名为anti-GP2.免疫荧光、ELISA结果均证实获得的单克隆抗体能识别LCMV抗原.用ELISA法鉴定出该单克隆抗体重链类型为IgG2b,培养液免疫效价大约为1.35×103.蛋白G Sepharose亲和层析填料纯化抗体后经SDS-PAGE检测证实纯化抗体成功.Western blot提示该单克隆抗体对LCMV的作用部位为病毒颗粒表面糖蛋白抗原GP2.结论 成功制备出了针对LCMV病毒颗粒表面糖蛋白抗原GP2的单克隆抗体(anti-GP2 mAb).
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