血必净通过上调ADAM17酶活性抑制EA.hy926细胞TLR4信号通路
Xuebijing injection inhibits TLR4 signaling pathway through up-regulating ADAM17 activity in EA.hy926 cells
摘要目的 探索血必净注射液(XBJ)抑制脂多糖(LPS)诱导血管内皮细胞Toll样受体4(TLR4)炎性信号通路的分子机制.方法 培养EA.hy926血管内皮细胞,加入不同浓度XBJ处理细胞4 h后,添加100 ng/ml LPS刺激细胞,Western blot法检测p-p38、p-p65、p-ERK、p-JNK及IκBα表达水平.无血清培养EA.hy926细胞过夜,加入20 μl/ml XBJ处理细胞不同时间,浓缩培养液,Western blot法检测培养液中TLR4受体含量和脱落酶ADAM17磷酸化水平;利用酶活性试剂盒检测细胞中ADAM17酶活性.结果 XBJ显著抑制细胞中TLR4介导的炎性信号.XBJ诱导细胞中p-ADAM17水平和酶活性随时间而升高,同时培养液中TLR4受体含量随时间而增多.TAPI-1(10 μmol/L)可显著抑制XBJ诱导的细胞膜TLR4脱落.结论 XBJ通过上调ADAM17活性诱导细胞膜TLR4脱落,从而抑制其对细胞内炎性信号的激活.
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