肺炎克雷伯菌感染小鼠肺部中性粒细胞亚群分化及功能异质性分析
Analysis of differentiation and functional heterogeneity of neutrophil subsets in the lungs of mice infected with Klebsiella pneumoniae
摘要目的 阐明肺炎克雷伯菌感染后小鼠肺组织中性粒细胞的亚群分化及功能异质性.方法 选用C57BL/6J小鼠,利用临床分离的肺炎克雷伯菌通过肺部雾化递送装置建立急性肺部感染小鼠模型,将28只小鼠随机分为对照组和Kpn滴注组,并结合流式细胞术及单细胞转录组测序技术对小鼠肺部中性粒细胞进行检测和分析.结果 肺炎克雷伯菌导致严重的肺组织损伤并引起相应的炎性因子上调,且招募大量中性粒细胞至肺部.利用单细胞转录组测序结果,根据标志基因将肺组织募集的中性粒细胞分为两个亚群(G0群和G1群),结合差异基因表达及功能评分分析,推测G0群具有颗粒调控相关特征、G1群具有吞噬相关特征.同时,通过基因Spi1、Cebpd、Runx1等表达情况,确定G0群和G1群均为成熟中性粒细胞.中性粒细胞成熟状态标志性蛋白CXCR2在小鼠肺部感染过程并非在肺部高表达,与其在骨髓和外周血中的作用不一致.结论 肺炎克雷伯菌感染肺部时,肺组织中性粒细胞具有异质性;髓系发育相关转录因子和颗粒相关基因的表达情况能更真实反映肺组织中性粒细胞成熟状况,对中性粒细胞免疫应答作用机制的研究具有重要意义.
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