中性粒细胞释放的多种酶对炎症反应和抗炎药物活性的评价作用探讨
Evaluation of inflammatory responses and anti-inflammatory drug activity by measuring various neutrophil-released enzymes
摘要目的 建立中性粒细胞在炎症反应中释放多种酶的测定方法,用于评价炎症反应程度和抗炎药物活性.方法 24只雄性BALB/c小鼠,随机分为溶媒对照组、模型组和地塞米松给药组.地塞米松给药组按2 mg/kg灌胃给药地塞米松混悬液,溶媒对照组与模型组灌胃等体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液;给药30 min后,模型组、地塞米松给药组腹腔注射3%巯基乙酸盐培养基造模,溶媒对照组注射等体积PBS.造模4 h后,收集小鼠腹膜腔灌洗液(PLF),通过自动细胞计数对PLF中细胞进行计数,流式细胞术检测PLF中细胞比例变化,酶联免疫吸附试验分析PLF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的浓度,测定PLF中髓过氧化物酶、弹性蛋白酶、碱性磷酸酶和β-葡萄糖醛酸苷酶的活性.结果 与溶媒对照组比较,模型组小鼠PLF中细胞总数、中性粒细胞比例、TNF-α、IL-6浓度、髓过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-葡萄糖醛酸苷酶的活性升高,巨噬细胞比例降低(P<0.05);与模型组比较,地塞米松给药组小鼠PLF中细胞总数、中性粒细胞比例、炎症因子浓度、髓过氧化物酶、碱性磷酸酶和β-葡萄糖醛酸苷酶的活性降低(P<0.05).结论 通过检测中性粒细胞释放的髓过氧化物酶、碱性磷酸酶和β-葡萄糖醛酸苷酶的活性变化,可以更方便地评价炎症反应和抗炎药物活性,同时可相对特异性地揭示炎症反应中中性粒细胞的活化状态及抗炎药物对中性粒细胞活化的抑制作用.
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