糖基化终产物对脉络膜微血管内皮细胞增生和管腔形成的影响

Advanced glycation endproducts enhance proliferation, but not tube formation in choroidal microvascular endothelial cells

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摘要目的:研究糖基化终产物(advanced glycationendproducts,AGEs)在年龄相关性黄斑变性发生中的作用.方法:使用lycopersicon esculentum agglutinin包被磁珠的改良方法分离牛脉络膜微血管内皮细胞(bovine choroidal endothelial cells,CEC),采用抗Ⅷ因子免疫细胞化学法和摄取低密度脂蛋白(dil-acetylated low-density lipoprotein,dil-ac-LDL)法进行细胞鉴定.将50g/L牛血清白蛋白和150g/L葡萄糖在37℃孵育6wk以制备AGEs,通过抗-AGEs抗体点杂交法定性分析.用MTT法(3,(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide assay)测定CEC增生,用Vitrogen凝胶系统观察管腔形成情况.结果:培养细胞中90%以上呈因子阳性,并具有摄取dil-ac-LDL的能力,表明具有内皮细胞的特征.制备的AGEs与抗-AGEs抗体具有亲和力.浓度在62.5～500mg/L范围内的AGEs处理CEC 3d后,细胞增生呈剂量依赖性增加.碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)可明显增强CEC中管腔样结构的形成(P＜0.05),但500mg/L和50mg/L的AGEs对CEC管腔形成无明显影响(P＞0.05).结论:AGEs可以促进CEC的增生,但对其管腔形成无影响.提示AGEs通过增强CEC增生,可能是渗出型AMD发病中潜在的启动因子之一.