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DT389-hbFGF免疫毒素的克隆与表达

Cloning and expression of immunotoxin DT389- hbFGF

摘要目的:构建含有白喉毒素氨基端389个氨基酸的片断(DT389)人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的融合蛋白(DT389-hbFGF)表达质粒并表达该免疫毒素,为阻止白内障术后囊膜混浊寻找物质基础.方法:提取灭活的白喉杆菌DNA和12 wk胎脑皮质RNA,应用PCR技术分别扩增出编码DT389的基因片段及编码18kDahbFGF的基因全序列,将两基因先后插入表达载体中,构建含有DT389-hbFGF融合基因的表达质粒,测序后,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,纯化并鉴定表达产物.结果:扩增后得到DT389基因片段及hbFGF全基因序列;构建了DT389-hbFGF融合基因的原核表达载体并成功表达.结论:DT389-hbFGF免疫毒素克隆表达的成功为药物抑制后发性白内障的研究奠定了物质基础.

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