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人白细胞介素-37慢病毒载体的构建与包装

Construction and packaging of human interleukin-37 lentiviral vector

摘要目的 探讨人白细胞介素(IL)-37慢病毒表达载体构建和包装.方法 以pcDNA3.1 (+)-IL-37为模板,用特异性引物聚合酶链式反应(PCR)扩增出IL-37全长编码序列;与载体pLVX-IRES-Green1酶切并连接,大量扩增纯化重组质粒及包装质粒;以适当比例共同转染293T细胞生产慢病毒;收集并浓缩慢病毒,检测慢病毒滴度及IL-37的表达.结果 所得病毒的滴度达到5×1012TU/ml;病毒感染A549细胞后,可以在细胞内稳定表达出IL-37 mRNA.结论 本实验成功构建出IL-37慢病毒表达载体,并包装获得了高滴度的病毒上清.所包装病毒上清具有感染力,在真核细胞中可以表达IL-37.

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分类号 Q782R446
栏目名称
DOI 10.3969/j.issn.1671-0800.2017.05.004
发布时间 2017-07-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
浙江省自然科学基金(LY17H010001); 宁波市自然科学基金(2016A610088); 宁波市自然科学基金(2015A610233); 宁波市科技惠民项目(2015C50018)
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