换一批
换一批利用PCR介导的基因定点突变技术构建L.plantarum P-8亚油酸异构酶突变体
Construction of the Mutants of L.plantarum P-8 Linoleic Acid Isomerase Using PCR Mediated Site-directed Mutagenesis
摘要以植物乳杆菌P-8 (Lactobacillus plantarum subsp.plantarum P-8)亚油酸异构酶为研究对象,通过http://swissmodel.expasy.org/,http://smart.embl-heidelberg.de/和vecter NTI等在线工具与软件,对亚油酸异构酶进行生物信息学分析并预测与酶活性相关的位点,预测亚油酸异构酶的3个氨基酸可能为第68位甘氨酸、第107位精氨酸和第172位组氨酸.设计1对含突变的引物,以重组质粒pQE30-LAI为模板,利用PCR介导的定点突变技术构建突变体.经序列比对表明,成功构建了突变体G68A(甘氨酸突变为丙氨酸)、R107L(精氨酸突变为亮氨酸)和H172P(组氨酸突变为脯氨酸),为进一步研究LAI的结构和功能奠定了基础.
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关键词
共轭亚油酸亚油酸异构酶必需氨基酸定点突变conjugated linoleic acidlinoleic acid isomeraseessential amino acidssite-directed mutagenesis
分类号
Q754
栏目名称
试验研究
DOI
10.3969/jissn.1671-9646(X).2015.08.002
发布时间
2016-05-05
基金项目
内蒙古自然科学基金资助项目
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