换一批红巴梨f3h基因的克隆及植物表达载体的构建
Cloning f3h Gene from "Red Ballet" Fruit and Its Construction of Plant Express Vector
摘要以成熟红巴梨果皮的总RNA为模板,根据仁果类果树的f3h基因的保守序列设计引物,利用RT-PCR方法从果皮中克隆出花青素生成相关基因f3h基因的全长cDNA,并将该片段连接到pGEM-T easy载体中.核苷酸序列测定表明,该基因全长1095bp,与苹果的f3h基因同源性高达92%,与矮牵牛相似系数达83%,与拟南芥相似系数达到82%.利用EcoRⅤ和BglⅡ对重组质粒进行酶切,回收1095bp条带,并将其连接到pBI121载体上,通过抗性筛选和PCR检测,证实了f3h基因已经构建到植物表达载体pBI121上.
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