换一批人转录因子USF基因在大肠杆菌中的表达、纯化及在FAK启动子中的结合研究
Expression, purification of human transcription factor USF and its DNA binding analysis in FAK promoter
摘要目的:在大肠杆菌中表达人源转录因子USF(upstream stimulatory factor)并进行分离纯化,进一步分析其在FAK(focal adhesion kinase)启动子中的DNA结合能力.方法:将人源USF cDNA克隆到表达质粒pET28a载体,然后将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达带His6-Tag的融合蛋白His-USF,通过镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE分析鉴定.EMSA分析纯化后的蛋白与FAK启动子的DNA结合情况.结果:His-USF在大肠杆菌中获得高效表达,镍柱亲和层析纯化得到了高纯度的蛋白,并能够结合到FAK的启动子上.结论:获得高效表达的高纯度His-USF融合蛋白,为USF对其靶基因的结合与转录调控的进一步研究奠定了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1671-6264.2007.04.007
发布时间
2007-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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