换一批
换一批利用CEA694-702-β2m融合蛋白制备HLA-CEA694-702复合体
Preparation of HLA-CEA694-702 complex with CEA694-702-β2m fusion protein
摘要目的: 获得大量CEA694-702-β2-微球蛋白(β2m)融合蛋白,并制备HLA-CEA694-702复合体.方法: 通过引物设计在β2m基因的5′端引入CEA694-702序列和Linker序列,并将目的基因克隆到质粒pET28a中,在BL21(DE3)中表达.CEA694-702-β2m和HLA重链蛋白用金属螯合亲和层析法进行纯化,并经稀释复性法复性.制备的HLA-CEA694-702复合体用PEG20000浓缩,应用ELISA鉴定其构象,并用尺寸排阻色谱纯化和鉴定.结果: HLA重链蛋白和CEA694-702-β2m蛋白经金属螯合亲和层析法纯化后纯度提高.ELISA鉴定结果表明稀释复性后HLA-CEA694-702复合体形成了正确的构象.利用尺寸排阻色谱对HLA-CEA694-702复合体成功地进行了纯化.结论: 利用CEA694-702-β2m融合蛋白成功制备出HLA-CEA694-702复合体,为HLA-CEA694-702四聚体的制备奠定了基础.
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栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1671-6264.2009.05.002
发布时间
2009-12-08
基金项目
国家自然科学基金
国家杰出青年科学基金
东南大学优秀博士学位论文基金
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