两种方法测量抗菌肽s-thanatin大鼠体内血药浓度的结果比较

Comparison of the results of the two methods to determine the concentration of antimicrobial peptide s-thanatin in rat plasma

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摘要目的:分别用间接竞争ELISA法和放射性同位素标记法测定不同时间点抗菌肽s-thanatin(Ts)在动物体内的血药浓度变化,比较两种方法测量结果的差异并分析原因.方法:制备Ts的多克隆抗体,分离纯化多克隆抗体并建立间接竞争ELISA方法的标准曲线.用125I对Ts进行标记,制作同位素标记法的标准曲线.18只SD大鼠随机分为3组,分别按20、10和5 mg·kg-1的剂量尾静脉注射给药(放射性同位素标记法中注射Ts为125I-Ts),于给药后不同时间点眼眶取血,分别用两种方法测定动物体内血药浓度,计算药物半衰期.最后,比较两种方法测量结果的差异,并对其进行分析.结果:间接竞争ELISA法测得Ts在动物体内的半衰期为1.5 h左右,而用放射性同位素标记法测得的半衰期为6 h左右.放射性同位素法测得的生物利用度大约为间接竞争ELISA法的20倍.结论:同位素示踪法测得的药物浓度为动物体内药物代谢物的总量,因此需要借助其它分析仪器才能进行准确的定量试验.