换一批不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6基因真核质粒的构建及表达
Construction and expression of the eukaryotic vector for the gene encoding the outer membrane protein P6 of the nontypeable Haemophilus influenzae
摘要目的:构建不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane protein P6,P6)真核表达的重组质粒,并在HeLa细胞中表达,为核酸疫苗的开发奠定基础.方法:以NTHi基因组为模板,扩增编码P6蛋白的基因片段,酶切、纯化P6基因与真核载体pcDNA3.1/HisA后进行连接,之后转化并筛选含有目的基因的重组质粒pcDNA3.1/HisA-P6;将重组子转染至HeLa细胞,荧光蛋白法检测其表达产物.结果:经质粒PCR、酶切、测序证实插入的基因片段为NTHi-P6蛋白编码基因;荧光显微镜下显示,该重组质粒能够在HeLa细胞中表达目的蛋白.结论:成功地构建了真核重组质粒pcDNA3.1/HisA-P6,并在HeLa细胞中表达.
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栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-6264.2011.03.022
发布时间
2011-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
河北省教育厅重点课题（(Z2010116)）
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