换一批人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白编码基因K8.1的分离、克隆及在大肠杆菌中的表达
Isolation and Cloning of Envelope Glycoprotein K8.1 Gene of Human Herpesvirus-8 and Its Expression in E.Coli
摘要目的:分离、克隆人类疱疹病毒8型(HHV-8)包膜糖蛋白K8.1编码基因,并置于大肠杆菌中作融合表达.方法:设计一对PCR引物,在引物的5｀端分别引入BamH I、Xho I酶切位点,以佛波酯(TPA)刺激的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增出K8.1编码基因,克隆至原核表达载体pGEX-6p-1中,构建含K8.1基因重组质粒.重组质粒转化大肠杆菌(E coli)BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白.结果:分离、克隆的411bp序列与基因数据库中所登记的HHV-8 K8.1序列呈现100%同源性.IPTG诱导后的菌体,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),显示有一个41 ku的融合表达蛋白产生.结论:HHV-8 K8.1编码基因在E. coli中初步获得正确表达.
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DOI
10.3969/j.issn.1007-4368.2004.02.004
发布时间
2004-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30100160.30271179）
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