换一批人类疱疹病毒8型包膜糖蛋白K8.1单克隆抗体的制备与鉴定
Generation and identification of monoclonal antibodies against the envelope glycoprotein K8.1 of human herpesvirus 8
摘要目的:制备人类疱疹病毒8型(HHV-8)包膜糖蛋白K8.1的单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定.方法:用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导含重组质粒pGEX-6p-1+K8.1的大肠杆菌BL21表达谷胱甘肽-S-转移酶GST/K8.1融合蛋白,将以包涵体形式存在的融合蛋白进行变性、复性、复性后的Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化.以纯化的GST/K8.1融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,常规杂交瘤技术制备单克隆抗体.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选分泌K8.1单抗的杂交瘤细胞株.免疫组化染色(IHC)和Western blot法鉴定单抗的特异性.结果:建立了一株稳定分泌抗K8.1单抗的杂交瘤细胞株,命名为3G10;IHC和Western blot法显示,3G10株单抗能特异地识别HHV-8 K8.1蛋白.结论:成功制备出抗HHV-8包膜糖蛋白K8.1的单克隆抗体.
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DOI
10.3969/j.issn.1007-4368.2005.10.001
发布时间
2005-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30100160/30271179）
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