摘要目的 探究鸦胆子苦素 A(BA)对结肠癌的抑制作用及机制.方法 采用不同浓度 BA(0、1、2、5、10、20、40、80 μmol·L-1)作用于人结肠癌HT-29 和HCT116 细胞,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力.通过流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell实验,评估BA对细胞凋亡、细胞周期、侵袭和迁移能力的影响.采用分子对接模拟BA与GSK-3β蛋白的结合,并通过Western blot检测细胞周期、上皮间质转化(EMT)相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达.建立HT-29 细胞皮下移植瘤小鼠模型,成瘤后,将小鼠随机分为 3 组,即空白组,BA低、高剂量组(0.1、0.2 mg·kg-1),每组 6 只,给药19 d后,处死小鼠,分离肿瘤组织.观察各组肿瘤体积随时间变化;采用Ki67 免疫组化法观察各组肿瘤组织细胞增殖情况;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达.结果 与空白组相比,BA可显著抑制HT-29 和HCT116 细胞增殖,IC50值为 10.80 μmol·L-1 和17.96 μmol·L-1.流式细胞术结果显示,BA显著诱导HT-29 细胞凋亡(P<0.01,P<0.001),并阻滞细胞周期于S期,伴随周期相关蛋白CDK2 和Cyclin A表达减少(P<0.05,P<0.01,P<0.001).BA抑制细胞迁移和侵袭能力(P<0.05,P<0.01,P<0.001),降低EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-Cadherin的表达(P<0.01,P<0.001),并上调E-Cadherin蛋白表达.此外,BA抑制β-catenin和p-GSK3β蛋白的表达.Wnt激动剂LiCl可显著拮抗BA的抗结肠癌作用;Wnt抑制剂XAV939 可增强BA的抗结肠癌作用.而体内实验中,与空白组相比,BA低、高剂量组肿瘤体积显著缩小(P<0.05,P<0.001).免疫组化结果显示,与空白组相比,BA低、高剂量组肿瘤组织中Ki67 表达显著降低(P<0.001).Western blot结果进一步证明BA在体内抑制Wnt/β-catenin信号通路.结论 BA抑制结肠癌HT-29 细胞活力、细胞侵袭和迁移,诱导细胞凋亡并引发细胞周期停滞,并且在体内能显著抑制HT-29 细胞皮下移植瘤的生长,其作用与抑制Wnt/β-catenin信号通路正相关.