双侧卵巢切除模型大鼠潮热特征的初步探索及二仙汤的调节作用
A Preliminary Study on the Characteristics of Hot Flushes in Bilateral Ovariectomy Rats and the Regulating Effect of Erxian Decoction
摘要目的 探索双侧卵巢切除术后大鼠的潮热特征以及二仙汤的作用.方法 48 只雌性SD大鼠随机分为假手术组、双侧卵巢切除组、17β 雌二醇组和二仙汤组,共 4 组,每组 12 只,采用双侧卵巢切除术去势后分别灌胃 17β 雌二醇(0.1 mg·kg-1·d-1)、二仙汤(8 g·kg-1·d-1),持续 6 周.在造模第 21 天和第 42 天,检测大鼠体质量、肛温、体表红外热像图等表征信息.ELISA检测血清E2 含量;采用HE染色观察大鼠子宫和足垫汗腺的病理变化;免疫组化检测下丘脑雌激素受体(ER)及温度感受器瞬时受体电位香草酸亚型 3(TRPV3)、瞬时受体电位香草酸亚型 4(TRPV4)表达;Western blot检测ERβ、PAC1R和PKA蛋白表达.结果 与假手术组同期比较,双侧卵巢切除组大鼠体质量增长显著(P<0.01)而 17β雌二醇组和二仙汤组大鼠体质量增长缓慢.与假手术组相比,双侧卵巢切除组和 17β雌二醇组造模后第 21 天肛温显著上升(P<0.01),造模后第 42 天肛温显著下降(P<0.05);造模后第 21 天与第 42 天,双侧卵巢切除组、17β雌二醇组和二仙汤组大鼠体表最高温度均显著下降(P<0.01),造模第 42 天,双侧卵巢切除组大鼠尾部/体内温度比值显著升高(P<0.05);双侧卵巢切除组汗点明显增加(P<0.01);双侧卵巢切除组、17β雌二醇组和二仙汤组子宫指数均呈明显下降(P<0.01);双侧卵巢切除组血清E2 显著下降(P<0.05);双侧卵巢切除组大鼠下丘脑ER阳性细胞数显著减少(P<0.01),而TRPV3 阳性细胞显著增多(P<0.05);17β雌二醇组ER和TRPV3 阳性细胞数减少(P<0.05),TRPV4 阳性细胞数增加(P<0.01);17β雌二醇抑制PAC1R和PKA蛋白表达(P<0.05),二仙汤显著抑制PAC1R、PKA和ERβ蛋白表达(P<0.01).与双侧卵巢切除组相比,二仙汤组第21 天肛温显著下降(P<0.01);17β雌二醇组和二仙汤组汗点明显减少(P<0.01);二仙汤组E2 水平显著升高(P<0.05),下丘脑ER阳性细胞数显著增多(P<0.01),ERβ和PAC1R蛋白表达量明显下降(P<0.01).结论 双侧卵巢切除模型大鼠可观测到潮热相关信息,其证候特征表现为阴虚内热兼阳气不足的阴阳失调;二仙汤通过促进雌激素分泌及其受体表达以影响温度变化的敏感性.
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