摘要目的 建立黄柏碱(PHE)代谢产物黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(M1)的制备方法,探讨M1 调节胰岛素抵抗(IR)-HepG2 细胞糖脂代谢紊乱的作用及机制.方法 利用肠微粒体体外孵育法结合高效液相、质谱、核磁共振(NMR)等技术完成对M1 的制备、提取、分离纯化及鉴定.以二甲双胍为阳性对照,考察M1 低(25 μmol·L-1)、中(50 μmol·L-1)、高(100 μmol·L-1)剂量给药IR-HepG2 细胞 24 h对其葡萄糖消耗量、糖吸收、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响.通过分子对接技术探讨M1 与IRS1/PI3K/AKT通路各关键因子胰岛素表面受体(INSR)、胰岛素受体底物 1(IRS1)、PI3K、AKT2 的结合能力.采用qPCR法及Western blot法分别检测M1 对IRS1/PI3K/AKT通路各关键因子mRNA及蛋白表达的影响.结果 经NMR确认分离纯化所得产物为黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(纯度为 95%).与模型组相比,M1 在各给药浓度均可显著提高IR-HepG2 细胞葡萄糖消耗量(P<0.01,P<0.001)及糖吸收水平(P<0.001),且作用比PHE更强(P<0.001);在中、高给药浓度可显著降低细胞TG及TC含量(P<0.001),其中在TG水平上其改善作用优于PHE(P<0.01);在各浓度均明显降低LDL-C含量(P<0.001),提高HDL-C含量(P<0.01,P<0.001).分子对接结果显示M1 与通路关键因子INSR、IRS1、PI3K、AKT2 具有良好结合活性.与模型组相比,M1 给药组不同程度提高INSR、IRS1、PI3K、AKT2、GLUT2 mRNA的表达,并且下调p-IRS1/IRS1 蛋白表达(P<0.001),上调PI3K、p-AKT/AKT、p-GSK3β/GSK3β蛋白表达(P<0.05,P<0.001).结论 建立的方法可用于制备高纯度M1,M1 通过调控IRS1/PI3K/AKT信号通路改善糖脂代谢紊乱,从而缓解IR.